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[실험] quantitative PCR, Real time PCR(qPCR, RT-PCR) 원리와 분석방법은?? 오늘 뽑아놓은 cDNA 로 quantitative PCR , qPCR 을 돌렸다!!! 내 cell에 있는 RNA, 그러니까 protein으로 발현하기 전 RNA를 extraction했고, 이걸로 cDNA를 합성한 후에 정량값을 비교하기 위해 qPCR을 진행했다! 근데 사실 나는 qPCR, 그러니까 정량값을 계산해본적이 없다. 그냥 cDNA를 합성해서 gel을 내려서 그 발광도만 육안평가하고 내가 디자인 한 PCR product대로 사이즈가 잘 나오는지를 확인해보았기 때문에 RTPCR을 평가하고 분석하는 방법은 잘 모른다. 이 기회에 한번 공부를 해보기로 했다!!!!! qPCR은 quantitative Real time PCR (qRT-PCR) 또는 real time PCR이라고도 불린다. 이 실험 기법은.. 2020. 11. 14.
[이론] 세포주기 (cell cycle) 에 대해서 알아보자!! 진핵세포의 세포주기는 G1, S, G2, M기 이렇게 총 4가지의 단계로 구분되는데, 3가지 단계인 G1, S, G2기를 통틀어서 간기(interphase)라고 하며, M기는 체세포분열 시에는 염색분체를 나누고 (karyokinesis) 세포질을 분할하여 두 개의 딸 세포에 분배하게 된다. G0기(또는 휴식기)는 세포주기를 벗어나 쉬는 상태로 양분 부족 등 세포 증식을 제한하는 조건에 있는 세포, 사멸하고 있는 세포, 분화가 끝난 세포 등을 말한다. 분열이 이루어지지 않는 분열정지기이지만 실제로 정지한 것은 아니다. 그 세포의 종류에 따라 신경전도, 특정 단백질 분비, 병원균에 대한 공격 등의 일을 수행하고 있다. 분화 후에 다시 세포주기를 이루지 못하고 계속 주어진 기능을 충실하다가 사멸하는 세포들도 .. 2020. 10. 16.
[실험] Apoptosis assay - In situ Direct DNA fragmentation assay (TUNEL assay) 인체의 정상조직은 세포증식과 세포 사멸 사이의 균형으로 항상성을 유지하고 있고 다양한 원인에 의하여 세포 증식이 활성화되거나 세포사가 감소하면 세포의 수가 비정상적으로 증가하여 종양을 형성하게 된다. 즉, 종양의 성장은 세포생산과 세포죽음 사이의 불균형으로 인해 생긴 결과라고 말할 수 있다. 이처럼 세포 생존 주기는 인간이 정상적인 유기체를 유지하는데에 정말 중요한 영향을 미친다. 그래서, 실험할 때 세포가 죽었는지 살았는지, 죽어가는 단계 중에서도 어떤 단계인지를 확인하는 실험들이 많이 있다. 이렇게 세포 주기를 확인하기 위해 여러 파라미터들이 있다!! 세포가 죽을 때는 apoptosis를 거치게 되는데, apoptosis는 세포사(死)의 한 형태로 외부 인자의 자극이나 내적인 변화에 의해 세포사경로가.. 2020. 10. 14.
[일상] 애드센스 광고 30일 제한 / 10일간의 휴가 끄읕 / 무기력 10일간의 휴가가 끝나간다 안돼ㅠㅠㅠㅠ 이번주 수요일, 목요일을 연차로 쉬면서 추석 연휴 포함해서 9월말부터 10월 달 동안 약 10일 정도 쉬었다. 추석 전에 회사 업무가 진짜 너무 바쁘고 벅차서 추석 때는 진짜 아무것도 하지말고 회복에만 집중하자고 생각했다. 매일 밤에 자고싶을 때 자고 일어나고 싶을 때 일어나면서 바뀐 건 피부가 진짜 꿀피부가 됐다. 그 전까지만해도 푸석푸석 건조해서 뾰루지도 막 났었는데 잠을 늘렸더니 확실히 피부가 좋아졌다. 그리고 눈 뜨고 있을 때 피곤하면 뻑뻑한 느낌이 드는데 뭔가 완화된 증상이 너무 좋았다. 진짜 추석때는 하루종일 놀았고 하루종일 쉬었는데 이번 주 또 5일 쉴 때는 좀 생산적이게 보내보자!라는 생각에 면접준비도 하고 포스팅도 하고 그러려고 했는데..!!! 했는.. 2020. 10. 11.