[실험] 효소면역측정법, ELISA란?? 엘라이자.. 너란 친구....♡

내가 먹는 오렌지 주스에 비타민 C가 얼마나 들어있는지 확인할 수 있는 방법이 무엇이 있을까?

 

정확히 어느 정도의 농도로 들어가 있는지 알 수 있는 방법은???

 

위의 오렌지 주스는 예를 든 것이고,

 

나같은 세포집사들은 내가 키우는 소중한 세포들이 분비해내는 물질들이 

 

어떤 것이 있는지 확인하고 싶을 거다.

 

왜냐하면 그 세포들이 분비하는 물질들이 어떤 것이냐에 따라서

 

응용할 수 있는 분야가 천차만별이기 때문이다.

 

면역세포의 경우에 항암효능을 가지고 있는 물질이나 싸이토카인 (cytokine)을 분비할 것이고,

 

줄기세포의 경우에는 재생효능을 가지고 있는 물질이나 싸이토카인을 분비할 것이다.

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내가 키우고 있는 세포는 mesenchymal stem cell(MSC), 즉 중간엽줄기세포인데,

 

Mesenchymal stem cell. 출처_Promo cell

 

이 줄기세포가 분비하는 단백질들을 이용해서 줄기세포배양액 화장품을 개발하려고 한다.

 

줄기세포배양액에서 재생인자로 손 꼽히는 인자는

 

Epidermal growth factor(EGF), 즉 피부상피세포재생인자이다.

 

EGF를 많이 포함하고 있는 배양액이면, 고함량으로 화장품에 포함되었을 때

 

피부가 재생이 되도록 도움을 줄 수 있을 것이라는 개념이 일반적이다.

 

자, 내가 키우고 있는 MSC가 EGF를 많이 포함하고 있다는 것을 어떻게 증명할 수 있을까???

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이렇게 내가 알고자 하는 물질이 얼마나 들어 있는지 정량적으로 분석하는 방법 중

 

가장 일반적이고 간편한 방법이 바로 !!!!!!!  효소면역측정법, ELISA 다.

 

ELISA plate. 내껀 노랗게 변한 정도가 심하면 농도가 높은거였다. 어떤 형광 붙이는지에 따라서 다름!! 출처_Goldbio

 

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay가 풀네임이고 생명과학 전공자라면 누구나 한 번 쯤 들어봤을 것이다.

 

ELISA analysis 를 위해서 준비해야 할 것을 먼저 알아보자.

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ELISA를 처음 실험해보는 사람이면 구매하기 위해 검색했을 때

 

같은 물질을 측정하는 ELISA라도 엄청 다양한 종류와 스펙에 어떤 것을 골라야할지 모를 수도 있다.

 

나도 그랬다.....

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일단 먼저 내가 측정할 물질이 어떤 상태로 있는지, 어떤 목적으로 측정할 것인지를 파악한다.

 

이것은 ELISA 종류를 선택하는데 지표가 되지만, 

 

요새는 좋은 제품들이 많이 나와서 Best seller 제품으로만 사도 빠른 시간 내에 정확한 측정이 가능하다.

 

ELISA는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA, Competitive & Inhibition ELISA가 있는데,

 

나는 거의 다 sandwich ELISA로 산다.

 

왜냐면 나는 기본 정량값만 측정하는 편이기도 하고

 

너무 편하구.. 시간 얼마 안 걸리구...... 제 시간에 퇴근하면서 결과도 빨리 얻고 싶기 때문에........

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그 다음 어느 정도의 농도로 있는지 대략적으로 파악을 한다.

 

이건 정말 중요하기도 하고 너무 편차가 심해서 해보기 전에는 모른다.

 

ELISA kit 구매하려고 검색해보면 25.6-1000 pg/mL... 이런 식으로 range 값이 나와 있는데

 

이게 이 kit가 측정할 수 있는 범위를 뜻한다.

 

이 농도 값으로 스텐다드 커브를 그리는데 이 값 안에

 

내가 가지고 있는 물질의 농도값이 들어오면 오차율을 줄일 수 있다.

(물론 serial dilution 하긴 하지만... 그만큼 키트 낭비하는거기도 하고.. 듀플리,, 트리플,, 해야하기 땜에

희석 배수 많이 하면 정확하긴 하겠지만 키트 낭비가 너무 심하다.

이 키트가 꽤 비싸기도 하고 ㅠㅠ 입고까지 심하면 2달 넘게 걸린다ㅠㅠ 내 시간 ㅠㅠㅠㅠ)

 

이럴 땐 선행문헌 조사해보고 대략 파악하면 되긴 한데

 

진짜 케바케이기 때문에 100% 보장할 수 는 없다.

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그 다음 여러 회사의 제품들을 싹 긁어다가 업체에 견적 문의를 해본다.

 

그리고 견적서가 오면, 가격과 입고 시기를 비교해보고 가장 적절한 것으로 구매한다.

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이 정도만 검토한 다음 원하는 ELISA kit를 구매하면 끝!!!!!!!!!!!

 

다음 주에 ELISA 찍어야 하는뎅.. 결과 잘 나왔으면 좋겠다..... 

 

제발!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!